OTOLOG KONDROSİT TRANSPLANTASYONU İLE OSTEOKONDRAL DEFEKTLERİN SAĞALTIM OLANAKLARININ ARAŞTIRILMASI: KÖPEK DİZ EKLEMİNDE KLİNİK ÇALIŞMA
No Thumbnail Available
Files
Date
2001
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Bu proje Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Ortopedi ve Travmatoloji Bilim Dalı Kliniğine getirilen değişik ırk, yaş ve cinsiyette 9 köpek üzerinde gerçekleştirildi. Bu çalışmada, in vitro koşullar altında köpeklerde kondrosit hücre kültürü yapılması, monolayer kültürde üreyen köpek kondrositlerinin fenotipik özelliklerinin araştırılması, yapay kıkırdak doku kültürleri için yeni tekniklerin araştırılması, osteokondral defektlerin kültüre kondrositler ile tamiri, in vitro koşullarda hücrelerin davranışlarının incelenmesi, osteokondral defektlerin onarımında kullanım olanaklarının araştırılması amaçlandı. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Ortopedi ve Travmatoloji Bilim Dalı Kliniği'ne diz eklemi topallık şikayeti ile getirilen köpekler detaylı bir şekilde klinik, radyolojik muayeneye tabi tutuldular. Kronik çapraz bağ kopuğu olan olgular osteokondral defekt olasılığı yönünden tekrar incelenerek, femoral kondiluslarında defekt bulunan 9 olgu, hayvan sahiplerinin izni ile çalışmaya alındılar. Olguların anestezileri 0.1 ml/kg Xylazin hydrochlorid enjeksiyonu ile premedikasyon sağlandıktan sonra 10 mg/kg Ketamin hidroklorürün intramüsküler olarak yapılmasıyla ile sağlandı. Olguların sağ omuz eklemlerine lateral triangular artroskopik teknikle girilerek, bir biopsi pensi ile ekleme aktif olarak katılmayan ve yük taşımayan bölgesinden 2-3 yerden kıkırdak doku örnekleri alındı. Bölge dikiş uygulanarak kapatıldı ve pansuman uygulandı. kıkırdak örnekleri transport mediumu içine steril şekilde nakledilerek, Gülhane Askeri Tıp Akademisi Tıbbi Genetik Bilim Dalı labarotuvarına götürüldü. Kıkırdak örnekleri 1 mg/ml tip II kollagenaz ile enzimatik digesyona tabi tutuldular. Elde edilen kondrosit hücrelerinin viabiliteleri ve canlı hücre sayıları saptandı. Tripsinizasyon işlemi ile subkültürler elde edilerek transplante edilecek kondrositler elde edildi. Postoperatif 15. günde enjektabl hale gelen jel formundaki otolog kültüre kondrosit hücre greftleri, aynı olgunun diz eklemindeki osteokondral defekte transplante edildi. Tibia proksimalinden veya femur lateral kondilusundan alınan periosteal greft ile bölge korundu. Olguların kopuk ön çapraz bağları modifiye Utrecht Üniversitesi Tekniği ile onarıldı. Operasyon bölgesi uygun şekilde kapatılarak, bölgeye küçük bir pansuman uygulandı, bandaj ile immobilizasyon yapılmadı. Olgulara postopeartif 5 gün süreyle antibiyotik uygulandı. Olgular postoperative 1., 3,, 5., ve 7. haftalarda klinik ve radyolojik muayenelere, 8. hafta sonunda da artroskopik muayeneye tabi tutuldular. Klinik kontrollerde olguların ekstremitelerini 1. ve 3. haftada kulanırken ağrı duydukları, fakat 5. ve 7. haftalarda giderek daha rahat kullandıkları ve ağrı duymadıkları belirlendi. Radyolojik kontrollerde osteokondral defektin 1. ve 3. haftalarda deprese görünümde olduğu, 5. haftada ise tamamen dolduğu izlendi. İki olguda ise 7. haftada tam dolum izlendi. Sekizinci haftada yapılan artroskopik muayenede defektin tamamen iyileştiği, dolduğu, kenarındaki sınırının bile belli olmadığı, defekti dolduran dokunun çevresiyle aynı renkte ve şeffaf olduğu, dayanıma karşı güç verdiği izlendi. Sonuç olarak; bu proje ile Türkiye de ilk kez köpeklerin omuz ekleminden alınan ufak miktardaki kıkırdak doku örneklerinden hücreler ayrıştırıldı, sağlıklı otolog kondrositler izole edildi ve steril koşullar altında, in vitro ortamda monolayer kültür sistemi ile hücre sayısı arttırıldı ve olguların diz eklemlerindeki osteokondral defektlere eklem şekil ve fonksiyonunu restore etmek için transplante edildi ve başarılı sonuçlar alındı.