ORAL EPİTEL HÜCRESİ VE ORAL EPİTEL HÜCRE DİZİNİ STREPTOCOCCUS PYOGENES ETKİLEŞİMİNİN İMMÜN REGÜLASYON ÜZERİNDEKİ ETKİSİNİN ARAŞTIRILMASI

Abstract

Mukozal immün sistemde epitel hücre, özgül olmayan immün yanıttan kazanılmış immün yanıta geçişte ve immün homeostazın regülasyon veya tolerans yönünde belirlenmesinde bir kavşak noktası oluşturmakta; antijene antijenin yapısı, miktarı ve sunum şekline göre nasıl bir yanıt oluşturulacağını belirlemektedir. Çalışmamızda insan ağız epitel hücresi (AEH) ve insan ağız epitel hücre dizininin (KB hücresi) farklı miktarlardaki Streptococcus pyogenese verdiği yanıttaki değişimlerin incelenmesi; ağız epitel hücresi ve KB hücresinin S. pyogenesin farklı miktarları ile uyarımının bakterisidal etkide ve doğal immüniteye aracılık eden IL-8, kazanılmış immüniteye aracılık eden IL-6 ve toleransa aracılık eden IL-10 gibi sitokinlerin üretiminde değişikliğe neden olup olmadığının araştırılması amaçlanmıştır.Çalışma öncesinde AEH ve KB hücreleri ve S. pyogenes ATCC 19613 suşu hazırlanmış; 1/1, 1/100, 1/1000 ve 1/10000 Efektör hücre/Hedef hücre oranlarında plaklarda karşılaştırılmıştır. 1 ve 6 saatlik inkübasyonların ardından her bir kuyucuktaki süpernatan üremenin engellenmesi deneyi için kuyucuklardan toplanmış ve kanlı agara ekilmiştir. 37oC'de bir gecelik inkübasyondan sonra plaklarda meydana gelen koloni oluşturan birimler sayılmış ve bakterisidal etki yüzdesi hesaplanmıştır. 1, 6 ve 24 saatlik inkübasyonlardan sonra kuyucuklardan süpernatan sitokin üretiminin ölçümü için toplanmış ve IL-6, IL-8 ve IL-10 seviyeleri ticari ELİSA kitleriyle değerlendirilmiştir. Çalışmaların istatistiksel değerlendirmesi Kruskal-Wallis testi ve multipl comparison testi ile yapılmıştır. Çalışmalar sonucunda S. pyogenes ile uyarılan AEH'nin 1. saatte ortalama % 38.7, 6. saatte ortalama %54.5 ve doza bağlı baterisidal etki gösterdiği; KB hücresinin 1. saatte ortalama % 36.3 ve 6. saatte ortalama% 37.7 bakterisidal etki gösterdiği tespit edilmiştir. IL-6, IL-8 ve IL-10'nun yapısal olarak AEH ve KB hücresinden salgılandığı saptanmış; farklı S. pyogenes miktarları ile uyarıma bu sitokinlerin üretiminde doz ve zamana bağlı olarak değişikler olduğu gösterilmiştir.