Blastosist sıvısı aspirasyonunun in vitro sığır embriyolarında dondurma sonrası viyabiliteye etkisi
No Thumbnail Available
Date
2017
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Sağlık Bilimleri Enstitüsü
Abstract
Bu çalışmada in vitro koşullarda üretilen sığır embriyolarından blastosist sıvısının aspirasyonu yapıldıktan sonra, embriyoların vitrifikasyon ve yavaş dondurma metotlarıyla dondurulup çözdürülmesini takiben viyabilitelerinin incelenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada lokal mezbahalardan toplanan ovaryumlardan elde edilen oositlerde maturasyon, fertilizasyon ve embriyo kültürü yapılmasını takiben zigotların cleavage kontrolü IVF sonrası 27-31. saatlerde ve 51-55. saatler olmak üzere iki kez inverted mikroskop altında kayıt alındı. Embriyonik kültürün 7-8-9. günlerinde oluşan toplamda 597 adet 5 hücreli ve 5 hücreden büyük aşamadaki zigotlardan 271 adet BL ve Exp-Bl elde edildi (%45,39). Bunların 141 adeti (%52,02) iyi kaliteli (good) olarak değerlendirilerek çalışmada kullanıldı. Embriyolar; aspire ve vitrifiye edilen embriyolar (Grup I), vitrifikasyon kontrol (Grup II), aspire ve yavaş dondurma ile dondurulan embriyolar (Grup III) ve yavaş dondurma kontrol (Grup IV) olmak üzere dört gruba ayrıldı. Aspirasyon gruplarında yer alan Bl/Exp Bl'nin blastosöl sıvısı, özel olarak hazırlanan kağillar cam pipet ile mikromanipülatör ve inverted mikroskop kullanılarak yapıldı. Embriyonun iç hücre kümesine dokunulmadan trofoblast hücreleri arasından mikroenjeksiyon pipetiyle girilerek blastosist sıvısının tümü blastosist kavitesi tamamen kollabe olana kadar aspire edildi. Bütün gruplarda çözdürme sonrası embriyoların canlılık oranları, 24-48-72. saatlerde ve 7 gün süre ile takip edildi. Yapılan istatistik değerlendirmeler sonucunda, her iki yöntem ile dondurulan embriyoların 3 gün ve 7 gün takiplerinde toplam hatched oranı ekspanded blastosistlerde blastosistlere göre daha başarılı bulundu (p=0,004 ve p=0,006). Çözdürme sonrasında embriyoların 24-48 ve 72. saatlerdeki toplam hatching-hatched oranı incelendiğinde; Grup I (%28,57), Grup II (%39,39) ve Grup IV (%41,18) arasında önemli bir farklılık bulunmazken, Grup III (%71,88) diğer gruplardan önemli bir şekilde yüksek bulundu (p=0,002). Çözdürme sonrası 7 gün süre ile incelenen embriyoların hatching-hatched oranı Grup III (%78,10)'te diğer gruplardan önemli bir şekilde yüksek bulundu (Grup I-%31; Grup II-%48,50; Grup IV-%55,90) ve Grup I,II ve IV arasındaki farklılığın ise önemsiz olduğu tespit edildi (p<0,001). Yapılan çalışmada, blastosist sıvısı aspirasyonunun yavaş dondurmada rahatlıkla kullanılabileceği ve başarılı sonuçlar elde edilebileceği sonucuna varıldı. Aspirasyon için embriyo seçiminde embriyonun ekspanded blastosist aşamasında olması, çözdürme sonrası viyabiliteyi olumlu etkilediği kanısına varıldı.
Description
Keywords
Blastosist sıvısı, aspirasyon